Simulación de cromatografía de exclusión molecular

Instrucciones:

1. Elige una muestra en el menú desplegable del extremo izquierdo.
2. Pulsa en el inyector para cargarla en la columna.
3. Opcionalmente, puedes aplicar otras muestras ahora o una vez que esté corriendo la cromatografía.
4. Pulsa en el grifo para que comience el flujo y se desarrolle la separación.
5. Se puede detener y reanudar el flujo pulsando de nuevo sobre el grifo.

Datos:

Matriz cromatográfica: Sephadex G-75 (intervalo de resolución para proteínas entre 3 y 80 kDa)

Muestras:

Ejercicios:

Tras cada ejercicio pulsa en el botón "comenzar de nuevo".

1. Carga en la columna: biliverdina, citocromo c, pociloporina, hemoglobina y ceruloplasmina. Luego abre el flujo de tampón PBS pulsando en el grifo. Observa el resultado y explica el comportamiento de cada proteína.
2. Carga en la columna ferricianuro y biliverdina. Luego abre el flujo. ¿Se han separado ambas moléculas? ¿Dónde está el ferricianuro?
3. Carga en el orden contrario: primero biliverdina y luego ferricianuro. Interpreta el resultado de ambos experimentos (2 y 3).
4. Para comprender el resultado anterior, carga en la columna el ferricianuro. Abre el flujo y, una vez la banda amarilla haya avanzado 1 cm, cierra el flujo. Entoces carga la biliverdina y abre de nuevo el flujo. Observa lo que ocurre. ¿Cuál de las dos bandas avanza a mayor velocidad? Explica el comportamiento.
5. Repite los procedimientos 2 a 4 con ceruloplasmina y ficoeritrina.